Prüfung auf lokale Verträglichkeit mittels einer humanen Zellkulturhaut

Abstract

Es wurde eine Methode entwickelt, die zur Abschätzung der Reizwirkung von Chemikalien dient, und die als eine Art "zweite Generation von Ersatzmethoden" zum Draize Test angesehen werden kann. Aus menschlicher Haut gewonnene Keratinozyten werden in 24-well-Platten bis zur Konfluenz gezüchtet. Nach zwei weiteren Tagen werden die Zellkulturhautstückchen (1 - 2 cm2) enzymatisch als zusammenhängender Zellverband abgelöst und eingefroren. Der Test erfolgt durch eine 24-stündige Inkubation der aufgetauten Zellkulturhaut mit der zu untersuchenden Substanz in einer Verdünnungsreihe. Durch eine 3-stündige Inkubation mit einer 0,4% Neutralrot-Lösung und einen Waschvorgang wird der von den lebenden Zellen aufgenommene Farbstoff extrahiert und photometrisch bestimmt. Erste Erfahrungen wurden mit dem Tensid Natriumdodecylsulfat gemacht.